fa جداسازی و تعیین خواص چهار پروتئاز جدا شده از لاتکس درخت انجیر بومی خراسان (Ficus Carica بيوشيمي Biochemistry مقاله اصیل پژوهشی Original Article زمینه و هدف: فعالیت پروتئازی لاتکس انجیر در مقالات متعددی گزارش شده است. مطالعه حاضر با هدف مقایسه پروتئازهای شیرابه (Latex) درخت انجیر بومی خراسان با لاتکس زیر گونه های مختلف از گونه کاریکا (Carica) انجام شد.روش بررسی: در این مطالعه تجربی، چهار پروتئاز (فیسین) به کمک روشهای جداسازی به کمک نمک (Salt Fractionation) و کروماتوگرافی بر روی ستون مونو S (نوعی رزین تعویض کاتیون) از شیرابه استخراج گردیدند. کمیت هایی چون فعالیت، غلظت، ضریب خاموشی مولی برای هر نمونه حداقل سه بار اندازه گیری شدند. مقایسه بین گروه ها از نظر فعالیت و ضریب خاموشی مولی با استفاده از آزمون آماری ANOVA مورد تحلیل قرار گرفتند. P<0.05 به عنوان سطح معنی داری در نظر گرفته شد.یافته ها: این پروتئازها در خواصی نظیر جرم مولکولی و ضریب خاموشی مولی، فعالیت مشابهی نشان دادند. فعالیت و جرم مولکولی به ترتیب به کمک رسوب دهی کازئین و روش SDS-Page تعیین شدند؛ همچنین این آنزیم ها رفتار متفاوتی از نظر ماندگاری بر روی ستون تعویض کننده کاتیونی نشان دادند که احتمالا به دلیل تفاوت اندکی در ساختار بنیادین و نقشه پپتیدی آنها می باشد. میزان پروتئین و فعالیت آنزیمی شیرابه به ترتیب 110 mg/ml و 242 IU/ml بود. اجزایی که دارای فعالیت آنزیمی بودند در فراکسیون های III-VI یافت شدند. جرم مولکولی فیسین های III-VI حدود 26.5 KDa تخمین زده شد. محلول 1% پروتئین های موجود در فراکسیون های III-VI در محلول NH4CO3 0.05M دارای ضریب جذب مولی (?280nm) به ترتیب در حدود 22، 21.5، 21 و 20.9 بودند. فعالیت آنزیماتیک فیسین ها (فراکسیون های III-VI) با استفاده از سوبسترای کازئین به ترتیب 61.6، 62.7، 63.4 و 67.2 (Unit/mol) تعیین شد.نتیجه گیری: بر اساس یافته های این مطالعه، شیرابه انجیر بومی خراسان در بین چهار زیر گونه مختلف فیکوس کاریکا از نظر تعداد و فعالیت پروتئازی فیسین بسیار به زیر گونه Calimyrna که در کالیفرنیای آمریکا رشد می کند، شباهت دارد. <div style="text-align: justify;">Background and Aim: The protease activity of fig latex has been reported in several articles. This study was carried out aiming at a comparison between proteases of the latex of Khorasan native fig tree and those of carica subspecies.<br> Materials and Methods: In this experimental study, four latex proteases (Ficins) were extracted using salt fractionation and chromatography on Mono-S column (Ion exchange media). Parameters such as activity, concentration and molar extinction coefficient were determined at least 3 times per sample. The different samples were compared according to activity and molar extinction coefficient, using ANOVA statistical analysis. P<0.05 was taken as significant.<br> Results: These proteases were similar with regard to molar extinction coefficient, activity and molecular weight. Activity and molecular weight were determined by cosein perpetration and SDSPAGE respectively. Besides, the enzymes showed different properties as to retention time on cation exchanging column. This is supposed to be because of little differences in their primary structures and peptide maps. Protein concentration and the activity of latex was calculated to be 110 (mg/ml) and 242 (IU/ml) respectively. Agents having enzymatic activity were found in fraction III-VI. Molecular weight of Ficins III- VI was stimated at about 26.5- 121. A 1% solution of proteins of Fractions III- VI in 0.05 M NH4CO3 had a molar absorption coefficient (&epsilon;280 nm) of about 22, 21. 5, 21, 21.9 respectively. Enzymatic activity of Ficins (fractions III-VI) using casein substrate was 61.6, 62.7, 63.4 and 67.2 (unit/mol) respectively.<br> Conclusion: According to this study, latex of Khorasan native Fig tree is relatively similar to Calimyrna subspecies growing in California/USA among the four subspecies</div> لاتکس انجیر, فیسین, خالص سازی, فعالیت آنزیمی Fig latex, Ficin, Purification, Enzymatic activity 5 11 http://journal.bums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-216&slc_lang=fa&sid=1 O. Rajabi امید رجبی 8700319475328460028510 8700319475328460028510 Yes Assistant Professor, Department of Medicinal Chemistry, Faculty of Pharmacy, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran دکترای داروسازی صنعتی؛ استادیار گروه آموزشی شیمی دارویی، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد A. Varaste عبدالرضا وارسته 8700319475328460028511 8700319475328460028511 No J. Danaee Baghaki جواد دانای باغکی 8700319475328460028512 8700319475328460028512 No A. Baratian علی براتیان 8700319475328460028513 8700319475328460028513 No L. Jahangiri لیلا جهانگیری 8700319475328460028514 8700319475328460028514 No