fa تعیین گونه انگل های عامل لیشمانیازیس جلدی با روش مولکولی در شهرستان مشهد انگل شناسي Parasitology مقاله اصیل پژوهشی Original Article <p>زمینه و هدف: لیشمانیازیس جلدی یکی از بیماریهای اندمیک واجد اهمیت بهداشتی در ایران است. تظاهرات بالینی این بیماری به دو شکل خشک و مرطوب دیده می شود. تشخیص گونه های لیشمانیا در هر منطقه جهت کنترل بیماری ضروری است، با توجه به تشابه مورفولوژیک آنها لازم است از روش های حساس از جمله واکنش زنجیره ای پلیمراز برای تعیین گونه های لیشمانیا استفاده گردد. مطالعه حاضر جهت تعیین گونه های انگل لیشمانیا به روش ملکولی از پاییز1390 تا تابستان 1392 در شهرستان مشهد انجام گرفت. روش تحقیق: ابتدا از ضایعات جلدی 100 بیمار مبتلا به سالک گسترش نسجی تهیه شد و از زخم 25 نفر از آنها کشت تک یاخته در محیطNNN غنی شده با RPMI انجام شد. نمونه های مثبت جهت استخراج DNA و آزمایش واکنش زنجیره ای پلیمراز استفاده شدند. در دو مرحله آزمایش PCR انجام گرفت، در مرحله اول جهت تشخیص جنس لیشمانیا از روش PCR استفاده شد و در مرحله دوم، نمونه های مثبت با روش Semi &ndash;nested PCR برای تعیین گونه های لیشمانیا مورد آنالیز قرار گرفتند. یافته ها: در مرحله اول PCR، آلودگی به جنس لیشمانیا در تمامی نمونه ها مثبت تشخیص داده شد. در مرحله دوم، 94% نمونه های مثبت لیشمانیا تروپیکا و 6% بقیه نمونه ها لیشمانیا ماژور تشخیص داده شدند. نتیجه گیری: با توجه به نتایج بدست آمده در شهرستان مشهد گونه لیشمانیا تروپیکا فراوانی بیشتری در مقایسه با لیشمانیا ماژور دارد.</p> <p>Background and objective : Cutaneous leishmaniasis is an endemic diseases with important public health in Iran. The cinical signs of disease were seen as dry and wet forms. It is essential to distinguish leishmania species in every area for designing control of diseases. The morphology of leishman bodies in each speiecis are very similar and need to sensitive diagnostic method such as PCR to differntiate of them. The present study,a molecular study has been done to identify of leishmania species in Mashhad area from autumn in 2011 to summer in 2013. Methods: Firstly, tissue smears were collected from the lesion of one hundred patients and from the ulcer of 25 paitents were cultured in NNN nutrified with RPMI . The positive samples (tissue smears and culture) were used for DNA extraction and PCR. PCR methods were used in two steps. Firstly a sensitive PCR was used to detect the leishmania genus and secondly , the positive samples were examined with species specific semi-nested - PCR Results: In first step of PCR, all of sampled were positive for Leishmania spp and in second step Leishmania tropica and L.major were detected in 94% and 6% in positive &ndash;PCR amplicon , respectively. Conclusion: Based on the results, Leishmania tropica is more prevalent than L.major in Mashhad area</p> لیشمانیا تروپیکا, لیشمانیا ماژور, لیشمانیازیس جلدی, واکنش زنجیره ای پلیمراز, مشهد Leishmania tropica, Leishmania major, cutaneous Leishmaniasis, PCR, Mashhad area 237 245 http://journal.bums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1247-1&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Karimian Shirazi محمد کریمیان شیرازی kyokushinkarimian@yahoo.com 8700319475328460027529 8700319475328460027529 No Department of Pathobiology, Faculty of Vet. Med, Ferdowsi University of Mashhad, mashhad, Iran; بخش انگل‌شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران. Gholamreza Razmi غلامرضا رزمی razmi@um.ac.ir 8700319475328460027530 8700319475328460027530 Yes Department of Pathobiology, Faculty of Vet. Med, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran گروه انگل‌شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران. Abolghasem Naghibi ابوالقاسم نقیبی 8700319475328460027531 8700319475328460027531 No Department of Pathobiology, Faculty of Vet. Med, Ferdowsi University of Mashhad, mashhad, Iran. گروه انگل‌شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران.